真的,我现在看到那些刚进实验室的师弟师妹还在为找数据头秃,心里就一阵无语。你们知不知道,现在做生信分析,最缺的不是技术,是找数据的耐心和方法。很多人一上来就抱着个Excel表格死磕,或者去那些乱七八糟的论坛问“有没有现成的数据”,我都想笑。
咱们今天不聊虚的,就聊聊两个真正能救命的神器:geo数据库和tcga数据库。别被这名字吓住,其实没那么复杂。
先说geo数据库。这玩意儿就像是一个巨大的公共图书馆,里面堆满了各种各样的芯片测序数据。它的优点是数据量巨大,几乎涵盖了你 imaginable 的所有疾病和样本类型。但是!它的缺点也很明显,就是乱。真的乱。你搜一个基因,出来的结果可能有一百个文章,每个文章的样本量、分组方式、甚至实验平台都不一样。
我之前带过一个学生,想找一个肺癌的数据做验证。他在geo里搜了半天,下了几十个数据集,结果发现有的用的是Affymetrix平台,有的用的是Illumina,连探针ID都对不上。最后折腾了一周,啥也没干成。所以,用geo数据库的时候,一定要看清实验设计。别光看标题,要去点进去看里面的Sample information。还有,记得去NCBI的GEO2R功能里看看,有时候直接在线分析比你自己下载再处理要快得多,虽然功能简陋点,但胜在方便。
再说说tcga数据库。如果说geo是杂乱的图书馆,那tcga就是精心整理的档案馆。它是癌症基因组图谱,专门针对各种癌症。它的优势在于临床信息非常完整。你不仅能有基因表达数据,还能拿到病人的生存时间、分期、分级甚至治疗反应。这对于做预后模型或者生物标志物筛选来说,简直是宝藏。
但是,tcga也不是完美的。它的样本量虽然对于单癌种来说够了,但比起geo那种海量数据,还是显得有点“小气”。而且,tcga的数据主要基于RNA-seq和芯片,如果你要做甲基化或者蛋白水平的验证,还得去其他数据库找。我之前帮一个博士改文章,他非要用tcga的数据去推论某种罕见病的机制,我直接告诉他:别闹了,tcga里根本就没几个样本,统计效力根本不够。
很多人问我,这两个数据库到底怎么选?我的建议是:如果你做的是探索性研究,或者样本量要求极大,先刷geo数据库,但要做好清洗数据的心理准备。如果你做的是临床相关性分析,特别是癌症领域,tcga数据库是首选,因为它的临床注释太完善了,省去了你很多手动整理表格的痛苦。
这里有个小窍门,很多人不知道。在搜geo数据库的时候,不要只搜疾病名称。试试加上“microarray”或者“RNA-seq”,这样能过滤掉很多不相关的数据。还有,tcga数据库虽然好用,但它的原始数据下载有时候很慢,建议大家用GDC Data Transfer Tool,比浏览器直接下稳定多了。
总之,工具只是工具,关键还是看你会不会用。别指望有一个数据库能解决所有问题。geo数据库和tcga数据库,一个广,一个深,结合起来用,效果最好。我见过太多人因为数据质量差,导致最后结果出不来,白白浪费几个月时间。真的,前期多花点时间筛选数据,后期能省一半的力气。
别总想着走捷径,生信分析没有捷径,只有扎实的基础和对数据的敬畏。希望这篇能帮到正在迷茫的你。要是还有不懂的,多看看官方文档,比在这里问我要靠谱得多。毕竟,我也不是万能的,我也经常去翻那些晦涩的说明书。加油吧,科研人。